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目前已有多种方法应用于**废水处理领域, 工程常采用物理-化学-生物方法联合处理工艺, 其中生物法由于其经济的特性成为目前该类废水处理的主流技术, 并作为主体工艺技术应用于生产实践中.然而由于尼古丁及多环芳烃等污染物的难降解性和生物毒性(Yuan et al., 2006; Qu et al., 2006), 导致活性污泥的处理体系出现出水水质差、系统运行不稳定等问题, 使传统生物处理技术面临巨大挑战(郭静波等, 2011) .而生物强化技术被认为是直接有效改善活性污泥性能, 提高系统运行效率的技术(Limbergen et al., 1998) .目前生物强化局限于单一菌株对活性污泥的强化处理(Wang et al., 2013), 并主要关注对单一污染物尼古丁的降解效能和机理分析, 如筛选获得以节细菌(Arthrobacter sp.)(Ruan et al., 2006; Hochstein et al., 1959), 假单胞菌(Pseudomonas sp.)(Chen et al., 2008; Ruan et al., 2005) 为主的尼古丁降解菌类群.然而作为生物强化的菌种只有能够长期稳定适应处理环境才能发挥较好的作用(Fantroussi et al., 2005) .**废水处理运行过程受产能、生产周期和**质量影响, 水质波动较大且成分复杂, 除了含有高浓度的尼古丁外, 还含有其他多种有毒有害污染物.单一菌株的处理往往不能达到预期效果.与之相比, 菌群的环境耐受能力强, 处理效果稳定, 在环境治理研究中较好的处理效果(Seib et al., 2015; Zhao et al., 2016) .
　　目前鲜有利用菌群进行**废水处理或生物强化的应用研究, 本研究旨在通过筛选驯化的方式获得活性降解菌群, 并分析处理前后**废水理化参数和**成分的变化, 利用克隆文库技术分析菌群构成及多样性指数, 解析菌群处理过程中**废水污染成分的变化及降解过程.本研究获得的菌群由于其构成的稳定性和代谢途径的多样性, 能够适应不同浓度的废水环境, 去除尼古丁的同时有效降解其他多种杂环化合物、芳香烃及酯类等污染物, 拓展了降解范围, 为菌群在**制品废水处理中的应用提供了理论指导.
废水来自于某**公司, 该公司产生的废水黄褐色, 浑浊并伴有典型**气味.废水基本理化参数检测按照《水和废水监测分析方法》规定进行(国家**, 1997) .其中COD、色度、悬浮物(SS)采用便携式水质分析仪(DR1900, 美国Hach公司)进行测定;生化需氧量(BOD5)采用BOD测试仪(美国Hach公司)进行测定;pH值采用pH电极法测定, pH计(FE20, Mettler Toledo);盐度采用折光率法进行测定, 盐度计(手持式盐度仪, 南京山特公司);氨氮含量采用纳式试剂分光光度法(GB 7497-87) 测定;可溶性磷酸盐采用钼酸铵分光光度法(GB 11893-89) 测定.
　　2.2 **污染物分析
　　利用固相萃取和气相色谱-质谱联用法(Gas Chromatography-Mass Spectra, GC-MS)分析**污染物.
　　水样预处理：取3份水样各500 mL, 分别用H2SO4和NaOH调节至pH小于2、自然pH和pH大于11, 用0.45 μm滤膜过滤后分别用固相萃取柱(Agela Cleanert C-18) 萃取(Yang et al., 2013) .固相萃取柱活化后, 水样以5.0 mL·min-1的流速渗透过固相萃取柱, 使污染物吸附于萃取柱中.预富集后抽真空10 min使小柱干燥, 依次加入乙酸乙酯、正己烷和甲醇, 每种**溶剂自然流下后收集洗脱的样品, 将同一个样品的淋洗液合并, 加入无水硫酸钠脱水, 后氮吹仪吹干浓缩过滤后用于定性定量分析微生物降解前后水样中的污染物类别和含量.实验中用到的所有**溶剂均为色谱纯.
　　GC-MS/MS联用仪(Agilent 7890A GC/7200 Q-TOF MS)分析污染物种类和含量.方法参照文献进行并略有调整(Yang et al., 2013), 仪器设置参数如下：①进样口温度：250 ℃;分流比：100:1(V/V);色谱柱：30 m×250 μm×0.25 μm (J&W HP-5, 320 ℃);载气：氦气;流速：1.2 mL·min-1;升温程序：平衡时间0.5 min, 50 ℃ 维持1 min, 之后10 ℃·min-1升温至130 ℃, 30 ℃·min-1 升温至280 ℃ 维持6 min, 整个分析流程20 min.② Q-TOF质谱条件：接口温度：280 ℃;离子源：EI, 70 eV;离子源温度：200 ℃;四较杆温度：150 ℃.分析流程开始阶段, 设置溶剂延迟3 min.
　废水基本理化参数列于表 1.在**制品生产过程中一般会有较多**成分溶解于水中, 从表中结果可以看出, 菌群处理前废水的悬浮物和化学需氧量都很高, 分别达到735 mg·L-1和2169 mg·L-1.结果显示处理前的废水色度为1250, BOD5也高达971 mg·L-1.废水的B/C为0.45.B/C即BOD5/COD, 是衡量污水可生化性的重要指标, 即污染物中可生化降解组分占总污染物的比例, 当比值大于0.45, 生物降解性高;在0.45~0.30之间, 生物降解性一般;在0.30~0.20之间, 较难生物降解;比值小于0.20, 较难生物降解(陈壁波, 2006) .测定结果表明废水水质可生化性较好, 适用于生物处理, 这同文献报道中的**制品废水属性一致(侯轶等, 2008) .